试验设计

 实验动物：选用2月龄BALB/C二级雌性小鼠(体重为22-28 g)作为研究对象，按照体重随机分为正常对照组、低剂量组(0.5 g/kg·bw)、高剂量组(1.0 g/kg·bw)，润肠通便试验另设阴性对照组和模型对照组。

 受试样品及饲喂剂量：采取灌胃法，饲喂低聚木糖的低剂量组为0.5 g/kg·bw和高剂量组为1.0 g/kg·bw，每日灌胃1次，剂量为0.02 (ml/g·bw)，连续灌胃14 d，空白对照组和模型对照组灌等量蒸馏水。

 肠道菌群的计数：给予受试物前及最后1次给受试物后24 h，无菌采取小鼠粪便，放入已灭菌的装有3 ml稀释液的试管中，称重后振荡混匀，使粪便完全均质于稀释液中。采取10倍系列稀释至10^-8。选择合适的稀释度分别接种在BBL培养基、EMB 培养基、叠氮钠-结晶紫-七叶苷琼脂培养基及LBS琼脂培养基上。培养24、48 h 后，以菌落形态，革兰氏染色镜检计数菌落，计算每克湿便中的双歧杆菌、大肠杆菌、肠杆菌及乳杆菌菌数，取对数后进行统计处理。

 小肠推进试验：在连续给予受试物14 d后，各组小鼠禁食24 h。试验开始前各剂量组给予受试物，正常对照组及模型对照组给予等量蒸馏水。30 min后，除正常对照组外，其余各组灌喂复方地芬诺酯50 mg(kg·bw)。20 min后，各组灌喂15%碳黑墨水 0.5 ml/只。20 min后，颈脱臼处死动物，立即取出自幽门至盲肠部的整段小肠，不加牵引平铺成直线。测量小肠全长和幽门至墨水运动前沿位移，按照以下公式计算小肠推进率: 小肠推进率(%) =墨水移动距离(cm) /小肠全长(cm) ×100%。

 小鼠排便试验：在连续给予受试物14 d后，各组小鼠禁食24 h。除正常对照组外，其余各组灌胃复方地芬诺酯10 mg/(kg·bw)。将小鼠放入鼠笼单独饲养，正常饮水进食。1 h 后，给各组小鼠灌胃15%碳黑墨水0.5 ml/只(试验组碳黑墨水含相应剂量的受试物) 。观察记录每只小鼠自灌胃复方地芬诺酯起的首黑便时间以及6 h内排便重量。

试验结果

(1)低聚木糖对小鼠体重的影响

 由表1可知，灌胃低、高剂量的低聚木糖对小鼠的体重没有影响。

 (2)低聚木糖对小鼠肠道菌群的影响

 由表2可知，在灌胃前肠道菌群无差异的小鼠，连续给予低剂量组(0.5g/kg·bw)、高剂量组(1.0 g/kg·bw)低聚木糖14 d后，与对照组相比，肠杆菌及肠球菌数量并无显著变化，乳杆菌及双歧杆菌数量均有显著提高；其中低剂量组乳杆菌增长5%(P＜0.05)，双歧杆菌增长 9%(P＜0.05)；高剂量组乳杆菌增长5%(P＜0.05)，双歧杆菌增长9%(P＜0.05)。与灌胃前相比，灌胃后空白对照组肠球菌显著增加14% (P＜0.05)，乳杆菌增长10%(P＜0.01)；灌胃后低剂量组肠杆菌减少5.2%(P＜0.05)，乳杆菌增长9%(P＜0.05)，双歧杆菌增长14%(P＜0.01)；灌胃后高剂量组肠杆菌减少9%(P＜0.05)，乳杆菌增长8%(P＜0.05)，双歧杆菌增长16%(P＜0.01)。

(3)对小鼠小肠推进率的影响

 粪便中双歧杆菌与肠杆菌数量的比值（B/E值）可作为肠道微生物定植抗力的临床指标，能从正反2个方面来评价肠道菌群结构的状况；B/E值≥1表示肠道定植抗力正常，B/E值＜1表示肠道定植抗力降低。由表3可知，在饲喂受试物前后，各组小鼠的B/E值均大于1，说明小鼠肠道定植力正常；在饲喂前，各组小鼠B/E值无显著差异；服用低聚木糖14 d后，对照组的B/E值与饲喂前没有差异，低、高剂量组与饲喂前相比分别提高28%和26%(P＜0.01)；与对照组相比，分别提高14%和13% (P＜0.05)，以上结果表明低、高剂量的低聚木糖均具有可以改善肠道菌群结构的功能。

       连续给予受试物21 d后，阴性对照组和模型对照组的小肠推进率分别为72.5%和38.2%，阴性对照组小鼠小肠推进率高于模型对照组90%(P＜0.01)，说明造模成功。低剂量组和高剂量组的小肠推进率分别为77.4%和84.0%；与模型对照组相比，低、高剂量组的小肠推进率分别提高102%和120%(P＜0.01)，这些结果表明低、高剂量的低聚木糖具有改善小鼠小肠推进率的功能。

(4)对小鼠排便功能的影响

 由表4可知，在连续给予受试物21 d后，与阴性对照组相比，模型对照组的首次排黑便时间增加186.5%(P＜0.01)，6 h内排黑便重量减少55.5%(P＜0.01)，说明造模成功。与模型对照组相比，低、高剂量组首次排黑便时间分别降低76.7%和85.6%(P＜0.01)；6 h内排黑便重量分别提高126%和183%(P＜0.05)，说明低、高剂量的低聚木糖具有有效改善便秘小鼠的通便作用。

试验结论

 低、高剂量的低聚木糖干预后，小鼠粪便内乳杆菌、双歧杆菌及B/E值均显著增加，且肠杆菌显著减少；此外小鼠首粒排黑便时间显著缩短，排黑便总量显著增加，小肠推进率显著提高，因此本研究表明低聚木糖具有改善小鼠胃肠道菌群及润肠通便的功效。

参考资料：

魏涛, 赵建元, 高兆兰, 王莉, 李思钰, 黄雪, 郑梦蕊. 低聚木糖调节BALB/C小鼠肠道菌群及润肠通便作用研究[J]. 安徽农业科学, 2013, 41(01):159-160+163.