试验目的 研究单独或联合添加枯草芽孢杆菌、低聚木糖对鲫鱼生长性能、免疫功能及肠道健康的影响。 试验设计 将420尾（9.77±0.04 g）鲫鱼随机分到12个桶，每桶35尾鱼，共分为4组，包括对照组（CK）、枯草芽孢杆菌组（B.S）、低聚木糖组（XOS）和合生元组（B.S+XOS），每组3重复。对照组投喂基础饲料，枯草芽孢杆菌组投喂基础饲料加枯草芽孢杆菌（作用浓度为1×108 CFU/g），低聚木糖组投喂基础饲料加低聚木糖（作用含量为0.1%），合生元组投喂基础饲料加枯草芽孢杆菌和低聚木糖，每天投喂3次（7：00、12：00和17：00），饲养8周。 在第4周和第8周取样，每桶随机取6尾鱼，取样前禁食24 h，通过尾静脉取血，收集血清放置于-20℃。收集肠道组织迅速放置于液氮中，然后转移至-80℃冰箱中保存。 在8周养殖试验结束后，称取测量鱼的体质量和体长，计算鲫鱼生长指标。生长指标相关计算公式如下： 增质量率（WG，%）=100×（末体质量-初始体质量）/初始体质量； 特定生长率（SGR，%/day）=100×[Ln（末体质量）-Ln（初始体质量）]/养殖天数； 饲料利用率（FE，%）=100×[增加的体质量/摄食量]； 蛋白质效率（PE，%）=100×[增加的体质量/（摄食量×饲料蛋白质含量）]。 提取鲫鱼肠道RNA并反转录为cDNA，以cDNA为模板，按照试剂盒说明书操作，采用荧光染料法在ABI 7500系统中进行qPCR，对肠道免疫相关基因包括IL-1β、IL-10、TNF-α和TGF-β进行检测。所得数据采用2-ΔΔCT方法进行处理分析，引物序列见表1。
试验结果 （1）枯草芽孢杆菌、低聚木糖和合生元对鲫鱼生长性能的影响 生长性能结果如表2所示。枯草芽孢杆菌组（B.S）、低聚木糖组（XOS）和合生元组（B.S+XOS）组的末体质量（FW）、增质量率（WG）、特定生长率（SGR）、饲料效率（FE）和蛋白质效率（PE）显著高于CK组（P<0.05）。B.S+XOS组的末体质量、增质量率、特定生长率、饲料效率和蛋白质效率均显著高于B.S和XOS组（P<0.05）。
（2）枯草芽孢杆菌、低聚木糖和合生元对鲫鱼抗氧化能力指标的影响 在第4周和第8周对鲫鱼血清抗氧化能力相关指标进行了检测，结果如图1所示。在第4周和第8周B.S组、XOS组和B.S+XOS组的T-AOC水平显著高于CK组（P<0.05），MDA水平显著低于CK组（P<0.05）。在第4周，SOD水平在各组别之间无显著差异（P>0.05），在第8周B.S+XOS组显著高于CK组（P<0.05）。在第4周XOS组和B.S+XOS组的CAT水平显著高于CK组（P<0.05），在第8周B.S组、XOS组和B.S+XOS组的CAT水平显著高于CK组（P<0.05），且B.S+XOS组显著高于B.S组和XOS组（P<0.05）。在第4周和第8周XOS组和B.S+XOS组的GSH水平均显著高于对照（P<0.05），B.S组在第4周与CK组无显著差异（P>0.05），第8周显著高于对照（P<0.05）。
（3）枯草芽孢杆菌、低聚木糖和合生元对鲫鱼肠道免疫相关基因表达量的影响 如图2所示，与CK组相比，B.S组、XOS组和B.S+XOS组的IL-1β mRNA表达量在第4周和第8周时均显著降低（P<0.05）。与CK组相比，B.S组、XOS组和B.S+XOS组的IL-10和TGF-β mRNA表达量在第8周时显著升高（P<0.05），且在第8周时，B.S+XOS组显著高于B.S组和XOS组（P<0.05），但是各组间IL-10mRNA表达量在第4周时无显著差异（P>0.05）。与CK组相比，B.S组、XOS组和B.S+XOS组TNF-α的mRNA表达量在第8周时显著降低（P<0.05），但是在4周时，仅有B.S+XOS组表达量显著降低（P<0.05）。
（4）枯草芽孢杆菌、低聚木糖和合生元对鲫鱼肠道结构的影响 如图3和表3所示，与对照组相比，B.S组、XOS组和B.S+XOS组的皱襞高度显著增高（P<0.05），且B.S+XOS组显著高于B.S组和XOS组。各组别之间固有层宽度无显著差异（P>0.05）。B.S组和B.S+XOS组肌肉层厚度显著高于对照组（P<0.05），XOS组与CK组无显著差异（P>0.05）。
试验结论 枯草芽孢杆菌、低聚木糖、枯草芽孢杆菌+低聚木糖合生元均可以提高鲫鱼生长性能，改善肠道组织结构，提高鲫鱼免疫和抗氧化能力，且枯草芽孢杆菌+低聚木糖合生元效果最为显著。 参考文献： 刘佳.NaHCO3胁迫诱导鲫鱼肠道损伤的分子机制及合生元调控作用研究[D].吉林农业大学,2023. |
